索氏提取器
一、实验原理
索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。国内外普遍采用抽提法,其中索氏提取是公认的经典方法,也是我国粮油分析首选的标准方法。此法花费时间较长,在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取。
利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。当溶剂加热沸腾后,蒸汽通过导气管上升,被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时,即发生虹吸现象,溶液回流入烧瓶,因此可萃取出溶于溶剂的部分物质。就这样利用溶剂回流和虹吸作用,使固体中的可溶物富集到烧瓶内。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而索氏提取法测定的结果只能是粗脂肪。
二、材料、试剂与器材
1.材料:干燥花生仁
2.试剂:无水X或石油醚,海砂
3.器材:滤纸,索氏抽提器(各部件必须洗净,用105℃温度烘干,其中抽提瓶烘至恒重),水浴锅,干燥器(直径15~18cm,盛变色硅胶),不锈钢镊子(长20cm) ,培养皿,分析天平(感量0.0001g),称量瓶,恒温水浴,烘箱,样品筛(60目)
三、过程
1.预试验(空白试验)
(1)样品测定:精密称取2~5g试样(可取测定水分后的样品),必要时拌以海砂,全部移入滤纸筒内;将滤纸筒放入脂肪抽提器内,连接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器抽提冷凝管上端加入无水X或石油醚至瓶内容积的2/3处,于水浴上加热,使X或石油醚不断回流提取,一般抽提6~12小时;取下接收瓶,回收X或石油醚,待接受瓶内X剩1~2ml时在水浴上蒸干,再于95~105℃干燥2小时,放入干燥器内冷却0.5小时后称量。
(2)计算,绘制曲线
X1= (m1-m0)/m2 x 100
式中: X1—样品中脂肪的含量,%
m1—接受瓶和脂肪的质量,g
m0—接受瓶的质量,g
m2—样品的质量,g
2.正式实验
(1)准确称量易干燥恒量的索氏抽提器接收瓶(W1)
(2)准确称取均匀粉碎的干燥花生仁2-6g(W),用滤纸筒严密包裹好后(筒口放置少量脱脂棉),放入抽提筒内
(3)在已干燥至恒重的接收瓶中,加入2/3的无水X,并装好索氏抽提装置,在45-50℃的水浴中抽提4-5h,抽提的速度以能顺利回流为宜。
(4)冷却。将接收瓶与蒸馏装置连接,水浴蒸馏回收X。无X再滴出后,取下接收瓶,于105℃烘箱内干燥1-2h,冷却至室温后称重(W2)。
四、计算
五、适用范围
适用于商品粮食、油料中粗脂肪含量的测定。
六、注意事项
1.抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
2.试样粗细度要适宜。试样粉末过粗,脂肪不易抽提干净;试样粉末过细,则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失,影响测定结果。
3.实验中的干燥处理:测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为:(1)抽提X中若有水,会使样品的水溶性物质溶出,导致测定结果偏高;(2)抽提X中若有水,则抽提溶剂易被水饱和(尤其是X,可饱和约2%的水),从而影响抽提效率;(3)样品中若有水,抽提溶剂不易渗入细胞组织内部,结果不易将脂肪抽提干净。
4.索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长,如能将样品先回流1~2 次,然后浸泡在溶剂中过夜,次日再继续抽提,则可明显缩短抽提时间。
5.若实验中样品较多的话,可采用容量更大的YG- Ⅱ型油分测定器来测定脂肪含量,温度控制在70℃左右,8h 可提取完毕。