细胞核中核仁理论上应被染成何种颜色,为什么,答案?
甲基绿吡罗红染液,它能将DNA染成绿色,将RNA染成红色.
细胞核中既有DNA又有RNA,理论上RNA少,所以细胞核会被染成绿色,但实际上,从显微镜下看是淡黑(重绿)色的.
怎样利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡?
一、基本原理
流式细胞仪检测细胞凋亡:PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等。
二、试剂与仪器
1、PBS溶液
2、PI染液:将PI溶于PBS(pH7.4)中,终浓度为100ug/ml。用棕色瓶4℃避光保存
3、70%乙醇
4、400目筛网
5、流式细胞仪
三、实验步骤
1、收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。
2、3ml PBS洗涤1次。
3、离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。
4、离心弃去固定液,3mlPBS重悬5min。
5、400目的筛网过滤1次,500—1000r/min离心5min,弃去PBS。
6、用1ml PI染液染色,4℃避光30min。
7、流式细胞仪检测:PI用氩离子激发荧光,激光光波波长为488nm,发射光波波长大于630nm,产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。
8、结果判断:在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上,凋亡细胞与正常细胞相比,前散射光降低,而侧散射光可高可低,与细胞的类型有关;在分析PI荧光的直方图时,先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片,在PI荧光的直方图上,凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二倍体峰。如以G1/G0期所在位置的荧光强度为1.0,则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为0.45,可用鸡和鲑鱼的红细胞的PI荧光强度做参照标准,两者分别为0.35和0.7,可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。
四、注意事项
细胞凋亡时,其DNA可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一,但这种DNA可染性降低也可能是因为DNA含量的降低,或者是因为DNA结构的改变使其与染料结合的能力发生改变所致。在分析结果时应该注意。
果蝇X细胞的细胞核内有几条染色体
- 果蝇X细胞的细胞核内有4条染色……果蝇是二倍体生物,体细胞中含有8条染色体,它的X细胞中染色体数是体细胞和一半,也就是4条染色体。
细胞核中染色体数目变化有什么区别
- 区别在于分裂过程。在分裂图像中,分裂后期细胞核染色体移向细胞两极,在图像中已经分开,细胞核染色体减半,分裂末期时细胞分裂成两个细胞,此时细胞内染色体才减半,因此在分裂曲线图像中就会出现此种区别。染色体是细胞内具有遗传性质的遗传物质深度压缩形成的聚合体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质);染色体和染色质是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。染色体出现于分裂期。染色质出现于间期,呈丝状。其本质都是脱氧核糖核酸(DNA)和蛋白质的组合怠恭糙枷孬磺茬委长莲(即X白组成的),不均匀地分布于细胞核中 ,是遗传信息(基因)的主要载体,但不是唯一载体(如细胞质内的线粒体)。
染色体:位于_______内,在体细胞中成_______存在,X细胞中成_______存在。细胞核分裂时_______加倍,
- 染色体:位于_______内,在体细胞中成_______存在,X细胞中成_______存在。细胞核分裂时_______加倍,使新细胞和原细胞所含的_______一样。
- 在体细胞中成_______存在